分光光度法目前只能測有顏色或具有吸光度的水質(zhì)樣品。如果所檢測水樣沒有顏色或者吸光值非常小,那就需要水質(zhì)檢測人員在被測樣品中加入能與被測物質(zhì)生成穩(wěn)定,且具有顏色物質(zhì)的反應試劑。而這個過程被稱為顯色反應,這種試劑被稱之為顯色劑。另外顯色反應在檢測時與顯色劑有關,而且與顯色的條件有關。
在水質(zhì)檢測時選擇顯色反應條件,主要目的是為了讓待測成分在選擇的反應條件下,能有效地轉(zhuǎn)變?yōu)檫m于光度測定的化合物。為了提高測定的靈敏度和準確度,必須選擇合適的顯色劑用量、溶液酸度、顯色時間和溫度等。
不同反應條件的顯色試劑
分光光度法的顯色反應條件
1.顯色劑的用量
在顯色反應中一般都加入適當過量的顯色劑,以使被測物質(zhì)盡可能轉(zhuǎn)化為有色化合物,但并非顯色劑加得越多越好,顯色劑過多,則會發(fā)生其他副反應,對水質(zhì)的測定不利。在實際工作中應該根據(jù)實驗要求常嚴格控制顯色劑的用量。
2.顯色溶液的酸度
有機顯色劑大部分是有機弱酸,溶液的酸度影響顯色劑的濃度以及本身的顏色。由于大部分金屬離子容易水解,酸度也會影響金屬離子的存在狀態(tài),進一步還會影響有色化合物的組成和穩(wěn)定性。因此,應通過試驗確定出適當?shù)乃岫确秶?并在水質(zhì)分析過程中嚴格控制。
3.顯色反應時間
有些顯色反應能夠迅速完成且顏色穩(wěn)定;有些顯色反應速率較慢,需放置一段時間,顏色才能穩(wěn)定。因此,應該在顯色反應完成后,顏色達到最大深度(即吸光度最大)且穩(wěn)定的時間范圍內(nèi)進行測定。
4.顯色溫度
一般情況下,顯色反應多在室溫下進行,但有些顯色反應需加熱到一定溫度才能完成。因此,不同的顯色反應應選擇適宜的顯色溫度,并應注意控制溫度。
5.溶劑
溶劑的不同可能會影響顯色時間、有色化合物的離解度和顏色等。在測定時標準溶液和被測溶液應采用同一種溶劑。